羊人工授精操作规程想学习的就仔细看看
点击上方 （2－5℃）。（1）、稀释液的配制常用的稀释液：柠檬酸钠蛋黄稀释液配方一：蒸馏水ml，葡萄糖3g,柠檬酸钠1.4g,鲜蛋黄20ml。配方二：蒸馏水80ml，葡萄糖0.8g,柠檬酸钠2.37g,鲜蛋黄20ml。配制时，称出葡萄糖和柠檬酸钠,置于量筒内,加入蒸馏水,溶解后再加入20ml蛋黄,摇匀待用.鲜蛋黄的制备:洗净蛋壳，用酒精棉擦拭待全干；打破蛋壳，倾出蛋白，蛋黄轻轻倒在滤纸上，注意不弄破蛋黄外膜；轻轻转动滤纸，使剩余蛋白吸附在滤纸上；用滤纸兜住蛋黄，一手捏紧滤纸四角，一手在滤纸外轻轻挤压蛋黄，将蛋黄液滴入浇杯内；弃去滤纸上蛋黄外膜；用消毒玻棒打匀烧杯内蛋黄，特别是同一烧杯内盛有不止一个蛋时，鲜蛋黄的采集，也可对滤纸上的完整蛋黄，用10ml注射器吸出需要量的蛋黄液，加入到基础稀释液内，再放入十几粒玻璃小球（事前消毒），摇晃几分钟，使之充分摇匀和研细蛋黄微粒的作用，保证稀释液配制的质量。牛奶稀释液：选用全奶、脱脂奶、奶粉均可。配制时应选用当天新鲜牛奶，并检查卫生壮况。其次准备一个大烧杯和一个圆锥瓶。大烧杯装水，圆锥瓶装牛奶，把圆锥瓶放在烧杯内，杯内水面应超过牛奶液面，直接在烧杯下加热，作为自制水浴锅用。制备方法：将牛奶用几层消毒沙布过滤到－ml圆锥瓶内，放入大烧杯内，慢慢加热，水开时沸滚后，继续加热8－10分钟，这时牛奶温度为92－95℃，达不到沸点温度；注意水浴加热和操作过程中不让水滴入牛奶中，水浴热奶时，最好加塞堵严；8－10分钟后取出圆锥瓶，将牛奶凉至30℃待用，牛奶冷却后取掉表层奶皮。选用奶粉时，一般用9g奶粉加ml蒸馏水，溶解后按照上述步骤进行消毒。（2）、配置稀释液注意事项：
配置稀释液，必须达到适宜精子存活并保持精子授精能力的目的。◆药品称量要准确，蛋黄要新鲜，蒸馏水要保持质量，必要时可采用双蒸馏水。◆稀释液最好现用现配，精液采出后应及早稀释。
◆配置前作好器械用具的消毒。玻璃和橡胶器材用洗涤剂清洗，再用2％的小苏打水清洗几遍，然后用清水冲洗3－4遍，最后用蒸馏水冲洗。玻璃器材放入烘箱内烘干备用（或用纱布包好蒸汽灭菌30分钟）。橡胶器材用 75％的酒精消毒后备用。
◆配成的稀释液应保持ph值为6.8-7.0。
◆稀释精液的顺序是加稀释液到精液中，而不能把精液加到稀释液中，二者的温度应保持30℃。◆稀释倍数 精液的稀释倍数取决于精子密度和计划输精母羊头数。鲜精一般以1－3倍为宜。超过此限的高倍稀释有可能保证不了每次输精所需的有效精子数量。绵羊人工授精要求每次输精有效精子数量（0.1ml精液)不少于万-1个亿。如下表：示例:现采得精液1ml,检查结果:精子密度5分,活率5分，现有发情母羊30只，试计算稀释倍数。查上表本次精液可作1：3稀释。由于现只有30只母羊需要输精，需要精液3ml，即1ml原精液加2ml稀释液（1：2稀释）可满足需要，没必要再次扩大倍数稀释。
◆精液稀释的操作步骤：
★稀释液配置完毕，连瓶置于30℃的水域内，牛奶稀释液加热后冷却，温度偏低时，需在水浴内重温至30℃。
★合格精液连同玻璃容器（集精杯或试管）放入30℃的水浴内，水面不易低于精液面。
★确定稀释倍数。
★按需要量吸取稀释液。稀液前最好先吸入少量稀释液，做清洗内壁用，弃去后在正式吸入需要量的稀释液，顺瓶壁缓缓注入精液内，轻轻摇动混匀。
★取一滴稀释液稀释精液，镜检活力。
★稀释精液回放入30℃水浴内。盖上玻璃，防止阳光直晒，污染尘土和小苍蝇叮爬。★精液稀释后，尽快使用。如有分装需要，在分装瓶上注明公羊号、采精时间、精子密度、活力和稀释倍数。
★如要进行高倍稀释，一般分步完成，先低倍稀释，几分钟后再做高倍稀释。
㈢精液保存
精液保存的目的在于通过抑制精子代谢活动，延长精子成活时间，而不降低受精能力。一般有常温（18－25℃）；低温（2－5℃）的液态精液保存和冷冻精液保存。
1、精液的低温保存：
精子的代谢活动随着温度的降低而逐渐减弱，在降至10℃以下时基本上受到抑制，现保存方法是将稀释精液由30℃降至2－5℃，保存到使用时为止，并不因此而丧失授精能力。
具体操作过程如下：
★配置好柠檬酸蛋黄稀释液或牛奶稀释液，按每毫升稀释液加入IU青霉素钠盐和IU链霉素。
★在30℃水浴内对精液按1：1－3倍稀释。
★将稀释精液用吸管注入消毒玻璃小瓶内，玻瓶宜事先放在30℃水浴内。瓶内注满精液，不留空隙，加塞盖紧，以次排净小瓶内空气，这样，对延长精子存活时间有好处。
★取用另一烧杯，放入30℃的清水，将小玻璃瓶一一立放，排齐后，烧杯放入冰箱。不用冰箱，改用冰瓶亦可。冰瓶内放入大半瓶的冰块。精液小瓶用几层纱布裹好，放入塑料袋内，连袋置于冰块上面，注意不可让精液小瓶与冰块直接接触，这样精子可能出现冷休克。
★降温全过程为2－3小时，一定要缓慢逐步降温到2－5℃，特别是从18℃降到2－5℃过程，切忌急骤降温，这一温度范围正是精子的敏感温度。
★温度在精液保存全期内必须保持在2－5℃。高于5℃，抑制不了精子的代谢和活动能力。低于0℃免不了造成精子死亡，使用电冰箱保存精液，注意停电时的应急措施。使用冰瓶保存时，每天检查补充冰块，倾掉水。
★精液低温保存时间以24小时为宜，时间过长，有可能使授精率下降和胚胎早期死亡率增加，因为精子在输卵管内存活时间，鲜精长达10小时以上，而保存24小时的精子仅为6－7小时和4－5小时。
1、精液的常温（18－25℃）保存：
精液的常温保存主要通过酸（如碳酸、乙酸等）抑制精子的代谢活动来实现，关键是稀释液的选择。过去采用的主要是伊利诺斯变温稀释液（一开始用于公牛精液，后经改进，也曾用来稀释公羊精液）和含有明胶的稀释液。二者均未能在生产上推广应用。
2、冷冻（－℃）保存：
冷冻保存精液可以大大提高精液的保存时间，超过了一般的时、空概念。例如种公羊死亡，仍可长时期利用生前制做的冷冻精液继代繁殖。我国自70年代开始将公牛冷冻精液应用于生产，并形成了一整套完善的工艺流程。而后又开展了绵羊冷冻精液的生产试验和应用。冷冻保存一般用液氮法和干冰法两种。一般多数采用液氮法，先将液氮注入液氮罐内，浸没冻精。如果液氮不足容器的三分之一时，应及时补充液氮。取放冻精后立即盖上罐塞，防止热气流或异物进入罐内，取放冻精时，切勿将提漏或精液包装提出容器外，只许提到罐颈部位，停留时间也不能超过10－15秒。贮精罐每年彻底检查或清理一次，用洗涤剂清洗罐内，水温以40－45℃为宜。四、输精器材用具的准备和消毒1、供采精、授精与精液接触的一切器材都要求做到清洁、干燥，存放于清洁的柜内（或箱内）。
3、假阴道、集精瓶内的洗涤和灭菌。
A：洗涤：
将集精瓶放入2％重曹水中（目前用洗涤剂或1％百毒杀液）清洗，然后用清水冲洗3－5遍，再用蒸馏水冲洗一遍，放入纱布罐内（或用纱布包裹），以备消毒。内胎放入洗涤水中清洗，再用清水反复冲洗几遍，吊在精液处理室内，用干净纱布蒙上，备用。
B：消毒：
操作者将指甲剪短，手洗干净，用75％酒精棉球消毒，安装假阴道。用消毒过的长两柄镊子夹95％酒精消毒棉球，进行内胎消毒，消毒应自内胎一端开始细致地一圈一圈的擦试至另一端。外壳用酒精棉球消毒一遍，放在消毒的瓷盆内，使酒精挥发后使用。集精瓶用蒸气灭菌后，放在消毒瓷盆内，用灭菌纱布盖好备用。
4、输精器的洗涤和消毒
A：用2％重曹水（洗涤剂或1％百毒杀液）反复冲洗数次，再用清水反复清洗，最后用蒸馏水冲洗数次，用毛巾包好，进行蒸气灭菌（或用清水冲洗数次，再用酒精反复冲洗，使用前用蒸馏水反复冲洗即可）。
B：使用前从灭菌器中取出，用灭菌的0.9%的盐水冲洗数次。
C：输完一只母羊后，输精枪尖端用95％酒精棉球擦拭，后用灭菌的0.9％盐水棉球擦拭，再给另外母羊输精。
D：开膣器的消毒：每天用完后用洗涤剂清洗，再用清水反复冲洗数次，进行蒸气消毒。开膣器数量少时，每次配完一只母羊后，用清水洗净擦干，进行酒精火焰消毒后，插入0.9％盐水中即可使用（或用盐棉擦拭后使用）。
5、其它器材的消毒
A：玻璃器材，用洗涤剂洗净，再用清水反复清洗，进行蒸气消毒。
B：纱布、手巾、台布等用洗涤剂清洗干净，再用清水冲洗，蒸气灭菌。
C：外阴部的消毒部用洗涤剂清洗干净，再用2％来苏儿消毒和清水洗净，自然干燥即可。目前大部分采用纸巾擦拭外阴部。
D：蒸气灭菌时，将上述需要蒸气灭菌的器材、用具和药液，有顺序的分别装入纱布罐内（或用纱布包好）或直接放在蒸气器里，盖上纱布，打开通气口，将蒸煮器的盖子盖严，水沸后蒸煮30分钟即可。
6、酒精棉球的制备：
配制75％的酒精，可用95％酒精78ml，加入蒸馏水22ml即可，棉球应做成直径2－3cm大小，放入广口瓶中或带盖瓷缸中，用75％酒精浸泡。五、采精1、采精时，
选择发情的健康母羊，把母羊颈部卡在采精架上保定，外阴部用2％来苏儿水（百毒杀液）消毒后，用清水洗涤药液并擦干。
2、假阴道准备
A：将消毒后的集精瓶灌满食盐水，插入假阴道的一端，深2－3cm，进行振荡冲洗后，将水倒出，使其内胎湿润，以代替润滑剂。
B：灌热水：将安装消毒好的假阴道，加入50－55℃的温水－ml,用漏斗注入假阴道的夹层内。
C：为使假阴道内腔松紧适度，需压入适量空气，一般看假阴道采精口的一端，内胎呈三角形为宜。
D：采精前，用消毒的温度计检查假阴道内部温度，温度一般保持在39－40℃。
E：采精时先用湿毛巾把种公羊阴茎的包皮周围擦净，采精者用右手拿假阴道，使其与地面呈35－40度角。当种公羊爬跨母羊，伸出能茎时，采精者应迅速左手指轻托阴茎包皮，将阴茎导入假阴道内。注意不要将假阴道边缘或手触摸阴茎，造成种公羊提前射精。射精后，将假阴道集精瓶一端向下竖起，送往精液处理室，放出空气，谨慎地将集精瓶取下，盖上盖，放在操作平台上标有种公羊编号的位置备用。
F：种公羊每天可采精2－3次，特殊情况下可采4－5次，一、二次采精间隔时间15分钟，二次采精后休息2小时，方可进行第三次采精。
六、授精
1、将授精母羊固定后躯或头部固定，外阴部用消毒液消毒，后用温水擦净药液以备输精。
2、原精液的授精量，每只母羊为0.05-0.1ml，稀释后的精液0.1-0.2ml注入子宫颈内。要求授入有效精子数量不少于七千万个以上。
3、精液的吸入，抽取前将输精腔抽取少许空气，然后在抽取精液，输精前做一镜检片子，在显微镜下检查精液品质和活力。合格者方可输精。
4、输精时，把消毒的开膣器按侧位轻轻插入阴道，旋转90度的同时，慢慢打开，先检查阴道内有无疾病症状（出血、浓汁等），轻度旋转或摆动开膣器，寻找子宫颈口。找到后，将开膣器固定在适当位置，将输精枪插入子宫颈内0.5-1.5cm,再用大拇指轻轻压活塞注入定量精液。
5、授精制度，可采用一次试情两次授精。即早晨试情一次，发情当时授精，第二天早晨再授精一次。第三天早晨再试情，如继续发情的母羊重新授精。也可采用一次试情一次授精制度或一次试情早晚授精制度。
6、授精母羊要做好标记，便于识别。
八、输精点及精液运送
1、输精点如果不养种公羊，所需精液，每天应定时由授精站取送。
2、送往输精点的精液评定不能低于“密??四”，远程运送应实施降温，近程不需降温。
3、运送精液应用广口瓶。用双层集精瓶采取的精液不必倒出来，盖上盖直接装入广口瓶中即可。
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